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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷方法

更新時(shí)間:2018-12-26   點(diǎn)擊次數(shù):1983次

    要完成一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn),不光要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備,還要熟練掌握操作方法及技巧,后就是實(shí)驗(yàn)的結(jié)果了。那么ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如何判斷分析呢?


1.儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3.檢測(cè)值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml


    ELISA的試驗(yàn)結(jié)果可用肉眼觀察顏色反應(yīng)的深淺作出判斷,也可用分光光度計(jì)作測(cè)定。當(dāng)然,后者更為正確。而肉眼觀察更為簡(jiǎn)便,而且也有一定正確性。據(jù)Adler(1980)報(bào)告,目測(cè)為±1+、2+、3+、4+相當(dāng)于分光光度計(jì)測(cè)定O.D值。


    不論用哪種方法判定結(jié)果,每次都要有陽性和陰性參考血清作對(duì)照,這樣可以消除一些外界的影響因素。
≤0.04“±”     0.06~0.092和0.08~0.25“+”
0.26~0.5“++”  0.51~1.0“+++”    > 1.0“++++”

     

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