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ELISA常見問題與解決方法

更新時間:2024-08-30   點擊次數:1266次

ELISA(酶聯免疫吸附劑測定)是一種常用的生物化學技術,用于檢測樣品中的特定抗原或抗體。然而,在實際操作過程中,科研

人員常常會遇到一些問題,影響實驗結果的準確性和可靠性,以下是一些可能出現的問題及其解決方法:


一、陰性對照出現陽性結果:


可能原因:試劑污染、操作不當、洗板不透徹。

解決方法:更換新試劑,小心操作避免污染,確保洗板透徹。


二、酶標板整體背景高:


可能原因:抗體非特異性結合、底物溶液污染、孵育過程未避光。

解決方法:使用封閉液封閉非特異性結合位點,適當稀釋底物溶液,確保孵育過程避光。


三、復孔之間重復性差:


可能原因:加樣時間不一致、加樣量不準確、洗滌條件不一致。

解決方法:保持加樣時間一致,使用同一移液槍確保加樣量準確,保持洗滌條件一致。


四、吸光值偏高或偏低:


可能原因:樣品使用量不當、抗體量不足或過量、孵育時間和溫度不當。

解決方法:調整樣品使用量至適宜范圍,確保抗體量適中,嚴格控制孵育時間和溫度。


綜上所述,ELISA實驗中的常見問題多種多樣,但只要我們認真分析原因并采取相應的解決方法,就能高效地提高實驗結果的準確

性和可靠性。在實際操作過程中,科研人員應不斷積累經驗,優化實驗條件和方法,以獲得更好的實驗結果。


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